Palestrante
Descrição
A leishmaniose visceral zoonótica permanece como uma das principais doenças negligenciadas, com impacto significativo em saúde pública e desafios persistentes no seu controle, especialmente na identificação de cães assintomáticos, principais reservatórios urbanos do parasito. A Reação em Cadeia de Polimerase é uma das ferramentas mais versáteis da biologia molecular, amplamente utilizada na detecção de patógenos. No entanto, sua acurácia depende da especificidade dos iniciadores, que devem reconhecer exclusivamente o DNA do alvo, sem amplificar sequências de organismos filogeneticamente próximos ou do hospedeiro. Essa especificidade é frequentemente comprometida pela alta similaridade genômica entre espécies do gênero Leishmania, favorecendo amplificação inespecífica. Esse cenário é particularmente crítico em espécies com pouca divergência genética, como Leishmania infantum, dificultando o diagnóstico específico. Diante disso, assegurar a especificidade dos iniciadores é essencial para a confiabilidade dos ensaios moleculares. Neste contexto, o presente estudo teve como objetivo desenhar e avaliar, in silico, iniciadores específicos para L. infantum. Foram selecionados três genes-alvo: HSP60 (proteína de choque térmico 60), CPB (cisteína peptidase B) e G3PD (gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase), avaliados quanto à especificidade, propriedades termodinâmicas e simulação de amplificação por e-PCR. Os iniciadores direcionados aos genes HSP60 e CPB apresentaram propriedades adequadas e elevada especificidade, sem evidência de amplificação em genomas de hospedeiros. As simulações indicaram amplificação específica para HSP60, com amplicon único no cromossomo 32, e para CPB, no cromossomo 8, ainda que este último tenha apresentado múltiplos sítios potenciais de ligação. Em contraste, o iniciador para G3PD não apresentou viabilidade. Em conjunto, os resultados reforçam a importância da validação in silico no desenvolvimento de ensaios de PCR, contribuindo para a redução de falhas experimentais e para o direcionamento das etapas de validação em bancada.
| Palavras-chave | e-PCR, Diagnóstico molecular; Desenho de iniciadores; Leishmania infantum; Leishmaniose visceral |
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| Em qual formato você prefere apresentar seu trabalho? | Pôster |
| Deseja concorrer à premiação de melhores trabalhos? | Não |
| O seu trabalho se encaixa em qual dos 20 Objetivos de Desenvolvimento Sustentável (ODSs)? | 3. Saúde e Bem-Estar |