Descrição
Palavras-chave: criopreservação, preservação DNA, ROS
A criopreservação espermática é muito utilizada na produção animal, mas ainda não é aplicada comercialmente na piscicultura de Prochilodus lineatus, popularmente conhecida como curimba; apesar disso, a criopreservação provoca efeitos deletérios nos espermatozoides. O processo de descongelamento expõe os espermatozoides a formação de cristais de gelo, desequilíbrio osmótico, estresse oxidativo e desnaturação proteica, comprometendo a integridade da membrana plasmática, a atividade mitocondrial e a estabilidade do DNA. Isso reduz a motilidade, a capacidade fertilizante e a sobrevivência larval pós-descongelamento. Contudo, as respostas moleculares do sêmen à criopreservação ainda são pouco conhecidas e dados proteômicos da espécie são inexistentes. O objetivo deste estudo foi investigar as alterações no perfil proteico do sêmen de P. lineatus após a criopreservação. O plasma seminal foi obtido por centrifugação do sêmen, seguido de precipitação proteica, incubação a -20 °C e centrifugação. Os pellets foram lavados, secos e organizados, e após nova precipitação, centrifugação e ressuspensão em solução tampão, foram quantificadas e submetidas à análise proteômica e identificadas 38 proteínas exclusivas. Entre elas, destaca-se a UGGT1, que repara glicoproteínas mal dobradas no retículo endoplasmático, e as proteínas Cullin-5 e UBE3A, envolvidas na ubiquitinação e remoção de proteínas danificadas. A ITPA protege o DNA da incorporação de nucleotídeos incorretos. A manutenção da motilidade depende da homeostase iônica mediada por PMCA3b e SERCA2, e da Gelsolin A, que regula a polimerização da actina do flagelo, sendo que danos a essas proteínas podem reduzir a fertilidade. O metabolismo energético também é impactado: a NADP contribui para a defesa antioxidante por meio da produção de NADPH, enquanto a Phosphoglucomutase-2 fornece energia necessária para a motilidade espermática. Quanto à integridade genômica, as subunidades do complexo FACT participam da remodelação da cromatina e do reparo do DNA, enquanto proteínas do complexo do poro nuclear facilitam o transporte nucleocitoplasmático e a reorganização da cromatina. Esses achados indicam que a criopreservação induz respostas adaptativas no reparo molecular e na preservação do DNA, mas que alterações em reguladores de cálcio e do citoesqueleto explicam a queda de motilidade.
Agradecimentos
Agradecimento ao apoio financeiro das agências CNPq (Projeto MAI-DAI 68/2022) e a FAPEMIG (projeto APQ-01070-18), além da estação de psicultura da CEMIG.
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